Дом » генетика » Как работает экстракция Chelex?

Как работает экстракция Chelex?

339
Последнее обновление: 2021-09-20 09:01:09


Ответить:
Принцип: смола Chelex работает , предотвращая деградацию ДНК из-за разрушающих ферментов (ДНКаз) и потенциальных загрязнителей, которые могут препятствовать последующему анализу. Как правило, смола Chelex улавливает такие загрязнения, оставляя ДНК в растворе. Это высвобождает ДНК в раствор. Аналогичным образом, какова роль хелекса в экстракции ДНК? Chelex 100 - хелатирующий материал от Bio-Rad, используемый для очистки других соединений посредством ионного обмена. Смола Chelex часто используется для экстракции ДНК при подготовке к полимеразной цепной реакции путем связывания с катионами, включая Mg 2 + , который является важным кофактором для ДНКаз. Во-вторых, почему важно кипятить клетки в присутствии хелекса? Chelex 100 - хелатирующая смола с высоким сродством к ионам поливалентных металлов, которые могут вызывать деградацию ДНК при высоких температурах (l). Кипячение ДНК в присутствии Chelex предотвращает деградацию ДНК. Какую функцию выполняет Chelex? Высокая температура служит для лизиса клеток, высвобождая таким образом ДНК. Однако при этом также высвобождаются нуклеазы ДНК, которые могут разрушать ДНК. Целью Chelex ® является хелатирование двухвалентных и трехвалентных катионов, которые необходимы для функции нуклеаз ДНК, в частности ионов Mg2 +./span> Почему ацетат аммония используется при экстракции ДНК? Присутствие обломков в растворе ДНК может привести к деградации ДНК при длительном хранении и ингибированию полимеразной цепной реакции. Мы использовали ацетат аммония для осаждения белков и смесь ацетат натрия с изопропанолом для осаждения ДНК , которая была промыта этанолом.

up